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浙江大学颂学位论文 缩写词表 一二氯苯氧乙酸乙酰丁香酮 苄基腺

时间:2019-08-18 19:31  来源:未知  阅读次数: 复制分享 我要评论

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  浙江大学颂。学位论文 缩写词表 一二氯苯氧乙酸乙酰丁香酮 苄基腺嘌呤 碱基对 头孢噻肟钠 乙二胺四乙酸小时 赤霉素 吲哚乙酸卡那霉素 摩尔每升 分钟 培育基 一萘乙酸光密度 复制起始位点 诱根质粒 聚乙烯毗咯烷酮 每分钟转速 质粒诱根底因座 利福平 转移根癌质粒 浙江大学硕 学位论文 右边界转移 左边界转移 致毒性酵母提取物卵白胨培育基浙江人学硕。 学位论文摘要八角莲 附属小檗科 药名鬼臼 为我国特有的濒危药用动物 其无效成分鬼臼毒素具有很强的抗肿瘤活性。而含鬼臼毒素的野活泼物资本 因为人们多年滥挖乱采 资本濒于毁灭 难以满足医药范畴的需要。本研究以八角莲无菌苗为材料 操纵动物心理学、分子生物学、化学成分阐发等研究方式与手艺 成立了 质粒介导的八角莲毛状根的遗传转化系统 并对诱导转化构成的毛状根中的鬼臼毒素含量进行了阐发 其次要研究内容及成果如下 初次操纵发根农杆菌 成立起药用动物八角莲毛状根遗传转化系统。发根农杆菌 传染八角莲茎段外植体 培育基中预培育、无外源发展调理剂的 培育基共培育 及添加 乙酰丁香酮 每天光照 可获得较好的转化结果 毛状根的诱导率最高可达到 。八角莲毛状根能在无外源激素的 固体培育基上快速自主发展。 对八角莲毛状根底因组 采用按照发根农杼菌鼬质粒基因组设想的引物 通过 检测、 杂交阐发 成果表白 所获得的八角莲毛状根在 基因不异大小条带具有发根农杆菌 质粒的 基因己整合到八角莲毛状根底因组并获得了表达。 对在分歧培育前提下构成的八角莲毛状根株系 以及由八角莲毛状根所构成的愈伤组织 采用化学方式提取此中的鬼臼毒素 使用 阐发了提取物中鬼臼毒素的含量 成果发觉 八角莲毛状根中鬼臼毒素含量最高可达 高于组培根 离体培育 接近于野生根 。八角莲毛状根在每天 光照培育前提下的鬼臼毒素含量 要高于置于暗中前提下培育的毛状根 八角莲毛状根构成的愈伤组织中鬼臼毒素的含量要高于八角莲非转化根构成的愈伤组织 但低于由叶片、茎段构成的愈伤组织。环节词发根农杆菌 八角莲 毛状根 鬼臼毒素塑婆叁堂墅 浙江大学硕学位论文引言八角莲 为小檗科八角莲属的多年生草本动物 药名鬼臼 为我国特有的药用动物。其根内无效成分鬼臼毒素具有很强的抗肿瘤活性 但其毒副感化遭到了临床使用的限制。 年代瑞士 公司将鬼臼毒素革新为鬼臼毒素糖甙化合物 临床上用于医治肺癌、睾丸癌等多种癌症。半合成鬼臼毒素衍生物在抗肿瘤药物中的普遍使用使鬼臼毒素作为抗癌药物出产中的主要原料的需要量急剧添加 而全合成鬼臼毒素的合成路线虽已成熟 但合成步调多 成本高不克不及满足医药工业的需要。而含鬼臼毒素的野活泼物资本 因为人们多年滥挖乱采 资本濒于毁灭 难以间接操纵。操纵毛状根培育手艺出产药用动物的次生代谢产品 是一条经济无效的路子。毛状根培育系统具有发展敏捷 遗传性状不变 激素自养等特点。同时 毛状根的次生代谢与一般根类似 出格适合根用次生代谢物的发生。摸索操纵发根农杆菌 侵染八角莲发生毛状根 并对毛状根进行离体培育 是八角莲药用资本可持续成长的无效路子。本研究是浙江省科技打算项目 目标是通过成立八角莲毛状根遗传转化系统 获得八角莲毛状根诱导培育的最优化方案。最终为鬼臼毒素类药物的提取、润色及药物的开辟和批量出产供给无效的原材料。在八角莲组培快繁研究的根本上 成立八角莲毛状根离体培育系统 并从中提取阐发活性物质鬼臼毒素 为此后操纵八角莲毛状根来出产鬼臼毒素奠基根本。 浙江人学珂 】。学位论文第一章绪论 发根农杆菌及毛状根 发根农杆菌发根农杆菌 农杆菌属的一种革兰氏阳性好氧菌 外形呈杆状 具鞭毛 能浸染大大都的双子叶动物及少数票据叶动物 发根农杆菌的 质粒上的 片段插入到动物细胞基因组中 其所照顾的基因在宿主细胞中整合表达 可诱导出毛状根 。发根农杆菌的诱导发根特征与其染色体毒性基因 色氨酸合成酶基因及其 质粒相关。 和色氨酸合成酶基因别离参与纤维素 葡聚糖和色氨酸的合成与农杆菌附着于动物细胞和受伤的动物细胞释放的酚类物质相关 是传染晚期阶段的需要步调 发根农杆菌的质粒 质粒的布局与功能 质粒 是独立于细胞染色体外的双链共价闭合环状 大小为 是发根农杆菌浸染后从质粒转移到动物细胞中的 包含激活转移的基因 也被称为致病区 调控质粒在农杆菌之间的转移 也称为连系编码区 次要功能为调控质粒的自我复制 分化冠瘿碱的功能区 分化冠瘿碱。发根农杆菌传染外植体后 转化并整合进入动物宿主细胞后操纵动物的养分成分能诱导合成一类叫做冠瘿碱的特殊氨基酸衍生物 该衍生物能被发根农秆菌作为独一的碳源和氮源而分化操纵。按照发根农杆菌合成冠瘿碱类型的分歧 能够将发根农杆菌及其 质粒分成以浙江大学预 学位论文下四品种型 、甘露碱型、黄瓜碱型 异黄瓜碱型 。一般来说 被侵染的宿主范畴是由融质粒的类型决定的 质粒的发根农杆菌有更普遍的宿主范畴。表发根农杆菌的类型及其转化的动物组织所发生的冠瘿碱 发根农杆菌类型代表菌株翘瘿碱类型 黄瓜碱型黄瓜碱甘露碱型 甘露碱 甘露碱酸 异黄瓜碱型异黄瓜碱 质粒 区基因布局与功毹 质粒 区基因的表达是发根农杆菌向动物细胞堆积和 转移所必需的。 区约为 位于复制起点和 区之间约 摆布分为 把持子 个基因配合起调控感化 它们虽不插入动物基因组中 但与质粒 的加工和转移相关。若是 区域缺失或突变 该菌株就无侵染能力 被传染的动物不呈现病症和毛状根。 基由于构成型表达 而其它基因凡是处于抑止形态 。当发根农杆菌浸染动物时 动物伤口部位的细胞汇合成很多可溶性小分子酚类化合物 如乙酰丁香酮 和羟基乙酰丁香酮 并与基因产品连系 诱导其他基因活化 从而发生传染过程。 基因对其他结合基因有启动与调理感化。基因能将 反复序列堵截 转移其他基因感化尚不明白。在 基因的感化下 复合体的形式逾越细菌质膜动物细胞壁 质膜 核孔进入动物细胞核 与动物浙江人学坝 。学位论文基因组 整归并表达。 两头各有 的反复序列 质粒上切出的酶识别位点缺此序列不克不及构成毛状根 质粒区的基因布局与功能 质粒的四种分歧类型之间的 区有很大分歧。农杆碱型 质粒的 有两个鸿沟区域 区域有与农杆碱合成相关的基因和发展素 吲哚乙酸 合成相关的基因 它们指点 的合成、零丁的 配合感化时转化感化大大高于两者的零丁感化 表白它们能够协同感化。 上有与农杆碱素合成相关的基因 和决定毛状根构成与形态的 基因群 又称为 。各类质粒均有 它是决定毛状根发展和再生植株某些形态特征的基因群。 基因表达惹起转基因植株构成大量毛状根 毛状根表示出发展快速、高度分叉、斜向发展的特点。此外 基因表达还能够惹起愈伤组织中呈现细胞坏死和幼嫩植株的叶片上呈现枯斑。在诱导毛根构成的 基因中 基因是最主要的 、烟草和高凉菜属 中均可零丁诱导毛根的构成 基因的转基因烟草原生质体对发展素表示出高度敏感性基因低程度表达即可导致原生质体发生高度敏感性 。虽然 基因编码卵白在体外能水解吲哚糖苷 但在动物体内 的堆集和代谢不受 基因表达的影响 。现己证明 基因编码卵白定位于质膜上 具有卵白质酪氨酸磷酸酯酶活性 表白在动物发展素感化机理中 也可能有一个激酶 级联放大系统在起主要感化 从而为阐明发展素感化机理指了然标的目的。 基因在烟草毛根转化体中表达导致植株变矮、顶端劣势削弱、叶片色素含量削减和雄性不育。 报道在烟草中 基因可零丁诱导毛根构成 但不克不及在高凉菜属组织中诱导出毛根。 基因表达也能添加原生质体对发展素的敏感性 但不及 基因结果强。比来的尝试表白 基因浙江人学颤【 学位论立编码酶卵白的产品的感化位点与 基因表达的位点不不异 因而 这一产品应是一个可运输的分子 基因编码卵白的定位、感化的同源底物、与等激素代谢之问的关系和涉及的发育改变的分子机制仍有待于进一步确定。 报道基因表达也添加了烟草原生质体对发展素的敏感性 但不及 基因结果强。 基因表达惹起的发育改变的大部门可能都是问接的 在导致组织和器官发育改变的一系列事务发生历程中 基因编码卵白只是在初期起感化 而其具体功能及其与细胞表示出对发展素的高度敏感性 代谢和植株矮化现象之间的关系尚不清晰。基因表达发生的表型现实上是各个 基因别离表达发生的表型的分析。在烟草中 单个 基因诱导毛根构成的效率不及两个以上 基因组合的效率高。发展素是 基因和 基因表达的诱导物 出格是对 基因 可使 基因表达量提高 上的与发展素合成相关的基因对诱导毛根构成不是需要的。 基因和发展素配合感化 诱导动物外植体被侵染部位的细胞分化构成毛状根。甘露碱型 黄瓜碱型和异黄瓜碱型 质粒只要单一鸿沟的 质粒的有较高的同源性。 质粒 插入动物细胞核基因组的长度与数量和发根农杆菌的类型相关 质粒的和黄瓜碱型 质粒的单一 在转化细胞中整合的长度是相当固定的 质粒的和甘露碱型 质粒的单一 在转化细胞中整合的长度有很大变化。在转化的毛状根中能够有多个 整合 这些 或者独立具有 非连锁 或者位于统一染色体上 连锁 。多个 的插入可能是因为多个发根农杆菌同时传染统一个动物细胞 且此中 均整合到动物细胞核基因组中 或由一个发根农杆菌内若干个 整合到一个动物细胞核基因组所致 曹冬梅等 。浙江大学硕 ‘学位论文图 质粒模式图引自 发根农杆菌 质粒与根癌农杆菌 质粒的比力发根农杆菌与根癌农杆菌同属根癌菌科根癌农杆菌侵染动物细胞后诱导冠瘿瘤及合成冠瘿碱 故所含质粒称为瘤诱导 质粒 质粒比拟质粒转化具有良多长处 周延清等 质粒能够间接用柬转化 再生出植株 而用 质粒转化时 为了防止肿瘤的构成 常采用除去 质粒 区癌基因的方式 毛状根由一个单细胞克隆而来 能够避免嵌合体 而根癌农杆菌 质粒转化动物发生的瘤组织有可能是一个转化细胞与非转化细胞所形成的嵌合体 质粒和 质粒能够共同利用 双转化外植体 操纵根癌农杆菌菌株传染栝楼 无菌苗诱导冠瘿瘤 然后用发根农杆菌菌株 传染其再生植株 诱导出的双转化毛状根与一般毛状根比拟 具有发展更敏捷等特点而卵白含量根基一样 毛状根在离体培育前提下。因而 质粒是比 质粒更抱负的基因转移系统。 发根农杆菌诱导毛状根构成的机制发根农杆菌对外植体的遗传转化具有原核生物中的细菌连系转移及真核细胞加工润色的特点。发根农杆菌附着到动物细胞后 只留在细胞问隙中、 起首在细菌细胞中被加工切下 然后转入动物细胞。并非整个 质粒都进入植

  ri质粒介导八角莲遗传转化及毛状根鬼臼毒素发生的初步研究,鬼臼毒素软膏,鬼臼毒素酊,鬼臼毒素,05 鬼臼毒素酊,鬼臼毒素软膏价钱,鬼臼毒素酊哪里有卖,质粒提取,穿越质粒,质粒载体